Запрещается движение без остановки перед стоп-линией, а если ее нет — перед краем пересекаемой проезжей части. Водитель должен уступить дорогу транспортным средствам, движущимся по пересекаемой, а при наличии таблички 
8.13 — по главной дороге.
Знак 2.5 может быть установлен перед железнодорожным переездом или карантинным постом. В этих случаях водитель должен остановиться перед стоп-линией, а при ее отсутствии — перед знаком.
Ставят вместо знака 
2.4, если водителю не хватает видимости встречного транспорта на пересекаемой дороге. Перед необорудованным светофором переездом — вместе со знаком 
6.16, за 10 м до ближнего рельса, если оттуда плохо видно приближающийся поезд.
ГОСТ Р 52289-2019, п. 5.3.7
Нижний край знака — на высоте 1,5–3 м вне населённого пункта и 2–4 м в населённом пункте, над дорогой — 5–6 м. От края проезжей части (или обочины) — 0,5–2,5 м.
ГОСТ Р 52289-2019, п. 5.1.7, 5.1.8
Знак должен быть виден не меньше чем за 100 м, а в населённом пункте при ограничении 40 км/ч и ниже — за 50 м.
ГОСТ Р 52289-2019, п. 5.1.4
На дороге с двумя и более полосами в одну сторону знак дублируют: на разделительной полосе, а если её нет — слева от дороги (когда встречных полос одна или две) или над дорогой (когда их три и больше).
ГОСТ Р 52289-2019, п. 5.1.6
Остановитесь обязательно — у стоп-линии, а если её нет, перед краем пересекаемой проезжей части. Потом уступите тем, кто едет по пересекаемой дороге.
Если перекрёсток регулируется работающим светофором, знаки приоритета не действуют: на зелёный останавливаться не нужно (пункты 6.15, 13.3).
Надпись «СТОП» на асфальте (разметка 
1.21) предупреждает о стоп-линии перед этим знаком.
Перед железнодорожным переездом знак требует остановиться у стоп-линии, а без неё — у самого знака. Трогайтесь, только убедившись, что поезд не приближается (пункт 15.2).